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關于生物切片的抗原修復,您了解多少?

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關于生物切片的抗原修復,您了解多少?

發布日期:2018-09-29 作者: 點擊:

關于生物切片的抗原修復,您了解多少?

    關于生物切片的抗原修復,您了解多少?生物切片抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。可根據實驗室的具體條件,選用微波爐抗原修復、高壓鍋抗原修復或水浴高溫抗原修復。

    生物切片高壓抗原修復操作方法:切片脫蠟至水。將1500ml~3000ml的枸櫞酸鹽緩沖液(工作液)注入不銹鋼壓力鍋中加熱至沸騰。切片置于金屬架上,放入鍋內,使切片位于液面以下,蓋鍋壓閥。當壓力鍋開始慢慢噴氣時(約加熱5~6分鐘后),計時1~2分鐘,然后將壓力鍋端離熱源,冷水沖至室溫后,取下氣閥,打開鍋蓋,取出切片,蒸餾水洗后,PBS洗2分鐘×3,下接免疫組化染色步驟。

   生物切片微波爐抗原修復操作方法:切片脫蠟至水后,3%H2O2處理10分鐘,蒸餾水洗2分鐘×3。將切片放入盛有枸櫞酸鹽緩沖液(工作液)的容器中,置微波爐內加熱使容器內液體溫度保持在92℃~98℃之間并持續10~15分鐘(注意:無論是使用醫用或家用微波爐,請根據具體機型酌情設置條件,務必滿足以上步驟中對溫度和時間的要求)。取出容器,室溫冷卻10~20分鐘(注意:不可將切片從緩沖液中取出冷卻,以便使蛋白能夠恢復原有的空間構型)。PBS洗,下接免疫組化染色步驟。

    生物切片電爐煮沸抗原修復操作方法:切片脫蠟至水后,放入盛有枸櫞酸鹽緩沖液(工作液)的容器中,并將此容器置于盛有一定數量自來水的大器皿中,電爐上加熱煮沸,從小容器的溫度到達92℃~98℃起開始計時15~20分鐘,然后端離電爐,室溫冷卻20~30分鐘,蒸餾水沖洗,PBS洗,下接免疫組化染色步驟。

生物切片


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