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生物切片中冰凍切片制作步驟?
冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環制冷冰凍切片法等。生物切片中冰凍切片制作步驟?你了解嗎?
1.取材:組織盡可能新鮮、驟冷愈快愈好,才能避免冰晶。而冰晶會對細胞產生無法彌補的破壞,直接影響免疫組化結果。所以,一般采用把組織懸于液氮臨界面上10-20秒后將組織投入液氮中驟冷。
2.恒冷箱溫度
一般在冷凍后10分鐘,到接近冷室溫度時再切,一般組織在-15~-20℃切片易成功。每種組織有其合適的切片溫度、刀的溫度和冷室溫度。
3.切片
由于生物切片冰凍切片的組織新鮮及驟冷包埋在OCT中,其實組織本身沒有滲透入包埋劑,所以組織本身還是比較軟的。這就對切片的技術要求比較高了,要求刀片鋒利,刀口角度良好,組織溫度與單片溫度與箱體溫度差合適;要求切片時進刀速度和力度都要把握好才能切出一張令人滿意的片子的。而抗卷板的前緣與刀面須有足夠的距離,使切片平滑通過。抗卷板略高于刀面的高點,得可憑經驗調整刀對組織的角度。