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教學切片標本廠家介紹不同切片的實驗方法及操作步驟
不同切片,采用的實驗方法也不相同。今天教學切片標本廠家為大家帶來了,石蠟切片、振動切片、塑料切片的操作步驟。
石蠟切片:其優點是組織結構保存良好,在病理和回顧性研究中有較大的實用價值,能切連續薄片,組織結構清晰,抗原定位準確。用于免疫組化技術的石蠟切片制備與常規制片略有不同:①脫水、透明等過程應在4℃。C下進行,以盡量減少組織抗原的損失。②組織塊大小應限于2cm×1.5cm×0.2cm,使組織充分脫水、透明、浸蠟。③浸蠟、包埋過程中,石蠟應保持在60℃以下,以溶點低的軟蠟較好(即低溫石蠟包埋)。
振動切片:用振動切片機(Vibratotme),可以把新鮮組織(不固定不冰凍)切成厚片20~100μm,以漂浮法在反應板進行免疫組織化學染色,然后在解剖顯微鏡下檢出免疫反應陽性部位,修整組織進行后固定,然后按電鏡樣品制備、脫水、包埋、超薄切片、染色觀察等。組織不冰凍,無冰晶形成和組織抗原破壞,在免疫組化染色前避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對抗原的損害,能較好地保留組織內脂溶性物質和細胞膜抗原,主要用于顯示神經系統抗原分布研究。這種包埋前染色,尤其實用于免疫電鏡觀察。
塑料切片:塑料包埋切片可切出比石蠟切片更薄的切片,光鏡切片可薄至0.5~2um,故稱半薄切片(Semithin section)。GMA保存抗原較好,不與組織產生共聚合,但形態學結構欠佳。環氧樹脂如Fpon和Araldite能較好地保存形態學結構,但在聚合過程中易和組織起作用,改變抗原結構。塑料包埋切片由于處理程序繁多,抗原活性易丟失。同時半薄切片進行免疫染色時,抗血清不易穿透樹脂,因此,塑料切片主要用于免疫電鏡的超微切片前定位。包埋前染色的標本,切片薄切片后不需染色,直接在相差顯微鏡下觀察免疫反應部位呈黑點狀,定位后進一步作超薄切片,這樣,可以明顯提高免疫電鏡陽性檢出率。