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病理組織石蠟切片染色是臨床診斷的重要輔助手段,.石蠟切片不易脫片,染色后可被長期保存,使得石蠟切片同患者病歷一樣,可被長期封存,對預防醫療事故的發生有一定作用,故被各大醫院廣泛應用.常規病理切片的制作步驟中有許多注意事項.本文主要從組織固定取材、脫水包埋、切片、漂片等過程,介紹病理石蠟切片制作過程中易出現的問題和解決辦法,以期進一步改善常規病理切片的制作,提高病理切片質量.
臨床所取標本要新鮮,否則細胞內溶酶體會破裂,造成細胞自溶.組織固定液多選用10%中性福爾馬林,其有效成分為甲醛,甲醛易揮發,使得福爾馬林的效用會越來越低,所以福爾馬林最好現配現用;固定液體積要超過標本的10~20倍,否則固定不充分,影響染色;固定標本的容器要以使標本不變形為宜;取材時,除嚴格按照病理標本取材操作規范外,小標本一般全取,大標本在去除不必要的組織后,要特別注意病變部位與正常組織交界處;取材切片觀察面要平整,否則組織經脫水后變韌,導致組織包埋時不能壓平于包埋盒中,切片時修整蠟塊很繁瑣.
現組織多采用程序化脫水浸蠟,所以要根據標本的多少及大小及時更換脫水機內試劑,否則會影響脫水效果,使組織與蠟不能相溶,無法制作出合格的組織蠟塊.條件允許的情況下可根據組織標本的不同選擇合適的石蠟,組織韌性大選擇高熔點石蠟,組織軟選取低熔點石蠟.包埋時,組織要充分壓平于包埋模底部,以保證組織的預期觀察切面在同一水平。
先向包埋盒中灌滴少許液體石蠟,此步驟可使成型蠟塊底部光滑平整,再將組織觀察面壓平于包埋盒底部,組織擺放緊湊但不重疊.為使包埋組織的蠟塊快速凝固,一般先將浸液體蠟的包埋盒置于冷凍臺上,蠟塊在置于冷凍臺上后,應在蠟大部分或完全凝固后,再移動包埋盒;若蠟塊未完全凝固,而移動了包埋盒,成型蠟塊底部平整度相差甚遠,有的凝固蠟塊底部平整,有的蠟塊底部不平整,可致小標本在修片的過程中被浪費.